مایع بدن شبیه سازی شده (SBF)

مایع بدن شبیه سازی شده (SBF) محلولی با غلظت یون نزدیک به پلاسمای خون انسان است که در pH برابر با 7.40 با 50 میلی‌مولار تری‌هیدروکسی متیل آمینو متان و 45 میلی‌مولار اسید هیدروکلریک در دمای 36.5 درجه سانتی‌گراد بافر می‌شود. SBF اولین بار توسط کوکوبو به منظور ارزیابی تغییرات روی سطح یک شیشه سرامیک زیست فعال معرفی شد. بعدها، محیط های کشت سلولی (مانند DMEM، MEM، α-MEM، و غیره)، در ترکیب با برخی روش های اتخاذ شده در کشت سلولی، به عنوان جایگزینی برای SBF معمولی در ارزیابی زیست فعالی مواد پیشنهاد شدند.

طریقه مصرف:

1. تمام بطری ها و وسایل را با محلول 1N-HCl، مواد شوینده خنثی و آب مقطر بشویید و سپس خشک کنید.
2. 500 میلی لیتر آب مقطر را داخل بطری پلی اتیلن یک لیتری بریزید و روی بطری را با یک شیشه بپوشانید.
3. آب داخل بطری را با یک همزن مغناطیسی هم بزنید و معرف ها را یکی یکی به ترتیبی که در جدول 1 نشان داده شده است حل کنید (هر کدام را پس از حل شدن کامل معرف قبلی اضافه کنید).
4. دمای محلول داخل بطری را توسط یک حمام آب در دمای 36.5 درجه سانتیگراد تنظیم کنید و با هم زدن محلول و تیتر کردن محلول با PH ،1N-HCl محلول را در  7.40 تنظیم کنید (پس از خارج کردن الکترود pH از محلول برای شستشوی الکترود مقداری آب به محلول اضافه کنید).
5. محلول را از بطری پلی اتیلن به یک فلاسک شیشه ای حجمی منتقل کنید. آب مورد استفاده برای شستشوی بطری پلی اتیلن را به محلول داخل فلاسک اضافه کنید.
6. حجم کل محلول را با اضافه کردن آب مقطر و تکان دادن فلاسک در دمای 20 درجه سانتیگراد به یک لیتر تنظیم کنید.
7. محلول را از فلاسک به یک بطری پلی اتیلن یا پلی استایرن منتقل کنید و بطری را در یخچال با دمای 5 تا 10 درجه سانتیگراد نگهداری کنید (اگر در طول نگهداری مقداری ماده در محلول رسوب کرد، از این محلول به عنوان SBF استفاده نکنید).

جدول 1: غلظت یون (mM) SBF و پلاسمای خون انسان

پلاسما خون	مایع شبیه سازی شده بدن	یون
142.0	142.0	+Na
5.0	5.0	+K
1.5	1.5	+Mg2
2.5	2.5	+Ca2
148.8	103.0	-Cl
4.2	27.0	-HCO3
1.0	1.0	-HPO42
0.5	0.5	-SO42

جدول 2: معرف های استفاده شده در تهیه SBF

مقدار	معرف	شماره
7.996g	NaCl	۱
0.350g	NaHCO3	۲
0.224g	KCl	۳
0.228g	K2HPO4･3H2O	۴
0.305g	MgCl2･6H2O	۵
40mL	1M-HCl	۶
(حدود 90 درصد کل HCl باید اضافه شود)
0.278g	CaCl2	۷
0.071g	Na2SO4	۸
6.057g	3(CH2OH)CNH2	۹